如此不准确的测试跟没有测试有什么区别,完全就是开玩笑( [% m& q r) ]! C8 M! u
3 a) u' f; w9 {( W; \印度媒体报道,随着新冠测试需求的不断增加,一个新的情况出现了——高达20%的有症状患者的RT-PCR检测结果是阴性。
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4 l! s2 o9 n2 x' x3 ?, H5 G w这种假阴性现象的出现,不仅意味着大批已经感染新冠病毒的患者,因为检测试剂的结果而被医院拒之门外;更重要的是随着这些患者四处走动,病毒也正在传播向更多的地方。
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! L( m$ {- p* o/ E- j* R什么是RT-PCR检测法?
* A+ a/ ?0 }& o- Q( e1 JRT-PCR检测被认为是诊断新冠病毒的黄金标准。根据此前的券商研报介绍:
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PCR核酸检测法的基本原理是根据已知基因序列信息,设计多对特异引物,运用DNA聚合酶链式反应(PCR)扩增技术,对处理后的样本进行基因扩增,因为引物的特异性,如果样本存在目标病原体,则会扩增出相应的目标基因片段,由此判断是否阳性。/ K7 O. @$ ^+ b' f3 C. S/ B9 m! A
+ u+ A% M/ S; H' h只要知道目标基因序列,设计多对引物,就可以套用已有技术平台,进行检测试剂盒开发,所以核酸法研发最快。
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/ e$ a0 C' B3 F5 [& b4 o5 y新冠病毒是RNA病毒,所以在PCR之前还需加上反转录(RT)过程,将RNA反转录成DNA后,再进行PCR。$ d0 r( `3 v' T5 w+ x9 n3 q5 [- }8 s
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印度医学研究理事会(ICMR)对RT-PCR检测要求的最低灵敏度(即检测阳性的能力)为95%,也就是说会有5%的假阴性结果。. o/ H" Y7 z/ q# J- w0 ?5 n1 @! N
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然而现实情况是,印度媒体了解到,印度的假阴性结果的比例正在上升,尽管尚未有数据支持。6 C6 n0 T9 c- M* D4 |8 o* P# i
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造成假阴性的原因是什么?
4 H* v- u# J+ m, @3 }理论上,RT-PCR检测结果的准确性又四个因素决定:病人体内的病毒载量、检测样本收集和处理的质量、试剂本身的有效性、以及检测解释的标准。* r2 N0 O& s9 ?& Y2 L/ b+ b
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根据这些因素,有印度媒体总结了印度假阴性结果比例如此之高的可能原因。" ?6 D( _3 M2 k Q/ M, g+ J( R
2 n' N3 H7 M6 b0 P首先以病毒载量为例,可能跟提取部位有关。
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一些在RT-PCR检测中呈假阴性结果的患者随后在支气管肺泡灌洗液(BAL)检测中呈阳性,即样本是从下呼吸道收集。这让一些人猜测,某些病毒变种绕过了上呼吸道、以肺部为目标,这可能导致基于鼻腔和喉咙样本的RT-PCR检测失效。, `3 |3 J1 a/ G& y
9 L6 h2 v! y$ j; ?- t9 e+ `2 @其次,是处理能力不足。数据显示,印度新冠病毒检测实验室数量从2020年2月初的14家,大规模增加到2021年4月的逾2400家。这不仅需要相关部门快速批准实验室,同时也需要大批训练有素的技术人员。
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印度媒体称,ICMR在2020年7月列出了30家质控机构对所有获批的检测实验室进行检查,随后又再增加了8家质控机构。然而消息显示,这些质控机构只对设备进行了几次检查,并没有随机抽取样本进行复检。( B4 L- F4 e; V. C
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第三是人为因素。所有的RT-PCR检测试剂包括了一个内部控制(Internal Control, IC),以防止没有RNA提取或扩增的情况。这个IC分外源性和内源性,印度市场超过75%的RT-PCR检测试剂是更便宜的外源性IC。起初ICMR认为外源性IC无法反应采集样本的质量,但是最后由于厂商抗议这种要求阻碍了公平竞争,而最终修改为外源性和内源性都可以。
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8 o, d, t$ k m# F7 @& Y7 [最后一点当然就是大家最关注的病毒突变了。RT-PCR检测的是特定一个或一些病毒基因片段,但是如果突变部位恰好是检测部位,那么就会出现假阴性结果。1 J" ]2 ?/ B% u2 b" C1 z- g6 {
4 V1 X7 ]8 S* E- V$ R# Q$ S" X/ W见闻此前文章提到,继此前发现双重变异病毒之后,印度多地已经出现三重变异病毒(triple-mutant variant,也称双突变变异病毒),即三种不同的新冠病毒毒株结合形成一个新的变种。这种新变种毒株比其他旧毒株具有更强传播力,为抗击疫情雪上加霜。( n% H) D ]9 x8 b2 f: Q
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